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不同消毒方式的效果比较

通过对多种消毒方式进行比较研究，选取不同测定时间点 (消毒前及消毒后的30min、2h、6 h、24 h、48 h、72 h)，检查消毒完成前后实验室的沉降菌最大平均浓度，比较各消毒方式最佳效果和持续时间;通过消毒剂在特定条件下对绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌进行杀灭实验， 比较消毒剂的杀菌率以及各种消毒方式的优缺点。

结果如表1、表2所示用甲醛的消毒方式效果最好; 臭氧、过氧乙酸最佳消毒效果持续时间保持在 48 h内; 消毒泡腾片及 84消毒液最佳消毒效果持续时间保持在 24 h内;新洁尔灭消毒后沉降菌最大平均浓度未符合相关国家标准的规定，且沉降菌最大平均浓度增长速度较快。各消毒剂对两种实验菌株的杀菌率均在99%以上，但新洁尔灭对绿脓杆菌杀菌效果差[1]。

不同区域的杀菌消毒剂浓度

对SPF级实验动物饲养器具(饲养盒、饮水瓶)浸泡消毒，有研究结果表明：采用0.1％的碘伏作用30min以上或0.05％的碘伏作用45min以上；2％的强化戊二醛作用5min以上或0.5％的强化戊二醛作用30min以上；华威一号有效含量达200mg/L作用20min以上，100mg/L或50mg/L作用45min以上；0.4％的过氧乙酸作用10min以上，0.2％的过氧乙酸作用20min以上或0.1％的过氧乙酸作用45min以上，可以达到99.9％杀菌率。

对SPF级实验动物设施屏障系统内墙面、笼面及空气进行喷雾消毒处理研究发现：浓度为2％的强化戊二醛、有效含量为250mg/L的华威一号、2％的过氧乙酸效果比较好。

对SPF级实验动物设施屏障系统内墙面、笼面进行擦拭消毒，0.5％、1％、1.5％、2％的戊二醛都能维持99.9％杀菌率2天；采用125mg/L、250mg/L、500mg/L的华威一号对SPF级实验动物设施屏障系统内墙面、笼面进行擦拭消毒，可以维持墙面和笼具99.9％以上的杀菌率1天，50mg/L的华威一号只能维持墙面99.9％以上的杀菌率1天。

采用0.25％和0.5％的碘伏对SPF级实验动物设施屏障系统内墙面、笼面进行擦拭消毒，均可以维持99.9％的杀菌率达5天，0.1％的碘伏可以维持99.9％的杀菌率3天，0.05％的碘伏可以维持99.9％以上的杀菌率2天。

采用过氧乙酸对SPF级实验动物设施屏障系统内墙面、笼面进行擦拭消毒，在第2，3，5天的杀菌效果都很好，0.125％的过氧乙酸即可维持99.99％的杀菌率5天。

上述结果说明四种消毒剂都适用于对SPF级实验动物饲养器具(饲养盒、饮水瓶)浸泡消毒，最适用0.1％的碘伏、2％的强化戊二醛、200mg/L的华威一号、0.4％的过氧乙酸。由于强化戊二醛对不锈钢无腐蚀性，所以强化戊二醛最适用于对SPF级实验动物不锈钢笼具的浸泡消毒，对于饲养盒、饮水瓶等非金属物品的浸泡消毒，则四种消毒剂都适用[2]。

采用空气落下菌检测法和表面细菌拭子检测法，对过氧化氢和甲醛熏蒸SPF级大鼠和小鼠繁殖室的消毒效果进行检测观察。过氧化氢和甲醛对大鼠繁殖室和小鼠繁殖室空气的杀菌率分别为100%、97.5%和100%、100%;将墙壁、地面和笼架表面的菌落数进行检测，过氧化氢和甲醛对大鼠繁殖室墙壁、地面和笼架的杀菌率分别为100%、99%、100%和95%、100%、99%，对小鼠繁殖室墙壁、地面和笼架的杀菌率均为100%。过氧化氢蒸汽消毒是比较理想的消毒方法，很好地控制了SPF级大鼠和小鼠繁殖室环境微生物，安全性高且消毒效果明显[3]。

过氧乙酸在较低浓度、较短时间内即可达到良好消毒效果，可用于擦拭、浸泡和喷雾消毒。

其他相关研究

有研究报道，0.3%~0.5%过氧乙酸5 min内即 可对大多数测试菌如沙门氏菌、布鲁氏菌、假单胞菌、金黄色葡萄球菌等起到良好杀灭效果，0.25%过氧乙酸1 min内即可对白色念珠菌达到良好杀灭效果。

余思义[4]使用过氧乙酸消毒液对实验动物饲养器具进行浸泡消毒，结果显示，0.4%过氧乙酸作用10 min、0.2%过氧乙酸作用20 min，均可达到99.9%的杀菌率；使用0.125%过氧乙酸对屏障设施墙面、笼架进行擦拭消毒，可维持99.9%的杀菌率5 d，且浓度越高，杀菌效果越好。刘建高等[5]使用0.2%过氧乙酸按8 mL/m³的用量对现场空气喷雾消毒作用30 min，杀菌率可达95.52%~99.36%。

尹进等[6]报道了二元包装的过氧乙酸消毒液的杀菌效果，结果显示 0.1%的该消毒液按照 10 mL/m³的用量对现场喷雾消毒，作用30 min，其对空气自然菌杀菌率 90%以上；悬液定量杀菌结果显示 0.01%的该消毒液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌作用5 min，杀菌对数值均大于5; 使用0.1%的该消毒液对枯草芽孢杆菌作用30 min，杀菌对数大于5。

郑吟秋等[7]芽孢悬液浸泡试验结果显示，0.2%过氧乙酸对枯草杆菌黑色变种芽孢作用10min，可完全将其杀灭。综上，在实验动物屏障设施中，建议 0.1% ~0.5%过氧乙酸用于耐腐蚀的物品、设施设备表面喷雾、擦拭或浸泡消毒；0.2%~0.5%过氧乙酸按8~12 mL/m³的用量用于屏障设施的空气喷雾消毒，每周3~5 次。

SPF级实验动物屏障实际生产的消毒方法应用中，理想的消毒方法应要求对安全、高效、稳定、低价位等特点进行综合考虑。例如物理消毒应该考虑被消毒物品的物理性能；在化学消毒法中选择消毒剂时，因消毒剂品种不同，对病原微生物作用也不同，应根据具体情况进行综合比较后做出适当的选择；同时还要考虑到化学消毒剂的理化因素，如温度、湿度、酸碱度、有机物、化学拮抗或中和作用，消毒剂的浓度变化等都会影响消毒效果，在消毒剂使用时也应考虑外部因素对其消毒效果的影响。在屏障实际生产运行过程中，往往采用多种消毒方法才能达到彻底消毒的效果。

各单位应结合自身情况，综合考虑各方面因素制定出-套合理的屏障设施回常维持性消毒方案，具体可包括消每液种类、用量、用法、定期更换、使用频次、使用区域等。有条件的单位可以进行相应的消毒效果验证研究，制定出更加科学合理的消毒操作规程。