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小鼠体外受精-胚胎移植实验中使用的手术器械、手术设备、耗材和试剂等都需要严格进行消毒或灭菌操作。

受体雌鼠和结扎雄鼠都选用SPF级，手术前后都需要送检，严格监控小鼠质量。

细胞培养液和精子获能液等需要提前做滴并覆盖石蜡油放置于培养箱过夜平衡。

抓取小鼠动作轻快，减少鼠的应激。

注射器使用后，需要进行消毒，避免交叉感染。

头部偏下，45度左右进针，避免扎伤脏器。

进针深度小于1cm，进针的感受为局部皮肤凹陷消失和落空感，避免出现皮下注射。

拔针时等待1-2s，轻微旋转针头，再缓缓拔出。

供体雌鼠安乐死后，快速消毒，采取俯卧位、两套工具剪开背侧皮肤和肌肉层。

快速准确采集输卵管，且确保不要剪破壶腹部。

输卵管可分多次少量采集，减少输卵管等待时间。

环境温度较低时，需添置加热设备。

输卵管如果血渍和毛发太多，放入石蜡油前需要先简单处理。

 划破输卵管壶腹部收集卵母细胞时，用力适度，划破但是尽量不留划痕，动作迅速。

卵母细胞复合物移入收集滴后，需检查是否收集完全，避免浪费细胞。

注意显微镜的温度，避免温度过高，影响细胞发育。

收集完细胞后，培养皿需及时放置于热台保温。

附睾尾采集时尽量将脂肪剖离干净。

收集精子的培养皿需放置于培养箱中提前获能。

获能后观察精子的活力和浓度，根据状态好坏决定加液量多少。

每一批次的细胞培养液和精子获能液需提前观察其状态（如：颜色和沉淀），并做预实验验证其效果和摸索最佳条件。

细胞培养箱需要定时进行检查，观察温度、CO2浓度和微生物污染情况等。

选择发情的受体雌鼠与提前试配不育的结扎雄鼠交配，挑取栓块明显且输卵管壶腹部明显的雌鼠进行二细胞移植。

手术过程中尽量减少受体鼠出血、活动和着凉等情况出现。

手术过程中注意细节，如：移植针的口径大小、手术加热装备、输卵管开口大小、细胞状态、移植气泡和液体比例和麻醉药剂量等。